Добро пожаловать


• Вход  • Регистрация
• Забыли пароль?

Обратная связь

О фирмах

Разделы

Сорбенты

Коллекторы фракций

Коллектор фракций - это прибор, предназначенный для разделения поступающего с колонки элюата на фракции запрогромированног объема (массы). В основном коллекторы фракций используются в связке с жидкостными хроматогрофами и в зависимости от цели хроматографического разделения данные приборы подразделяются на аналитические, полупрепаративные , препаративные и прмышленные. Их принципиальное отличие заключается в максимальном объеме собираемых фракций, что влечет за собой принципиальные отличия в конструкции.

Так аналитические и полупрепаративные КФ представляют собой прибор с ячейками для флаконов (пробирок) в которые собираются фракции и тракта подачи элюата. В зависимости от конструкции для совмещения выхода тракта (капельница) и требуемого флакона существуют приборы как с подвижными ячейками, так и с подвижным трактом (Рис.1). Объем каждой фракции может варьировать от долей миллилитра до десятков миллилитров, их число может доходить до нескольких сотен, а продолжительность сбора одной фракции может составлять минуты или часы — все это ставит перед конструкторами коллекторов непростые задачи по сочетанию вариабельности рабочих параметров с компактностью и надежностью работы прибора. Последнее требование имеет особо важное значение, посквльку коллекторы работают, как правило, без наблюдения за ними (например, в ночное время), а также нередко в условиях повышенной влажности, в холодной комнате.

Рис.1. Аналитический хроматограф низкого давления с коллектором фракций карусельного типа (К).

 Дозировка объема фракций может осуществляться различными способами. Почти вышла из употребления дозировка по суммар­ному объему фракции с помощью сифона (как, например, в простом коллекторе фирмы «ISCO», модель 2111). Стеклянные сифоны хруп­ки и пригодны лишь для сбора относительно больших объемов. Широко распространенная дозировка путем отсчета капель с по­мощью фотоэлемента не отличается точностью (иногда отклонения достигают +20%), поскольку поверхностное натяжение жидкости и объем капли могут изменяться как в ходе элюции за счет смены элюента, так и от опыта к опыту за счет колебаний температуры и давления окружающего воздуха. Дозировка путем отсчета вре­мени с помощью установленного в коллекторе таймера опирается на постоянство скорости подачи элюента насосом. Между тем, эта скорость может изменяться в ходе хроматографического опыта за счет изменения сопротивления колонки. Наиболее совершенным является вариант импульсного управления коллектором (сменой фракций) от перистальтического насоса, исходя из фактической скорости его работы.

  Некоторый минимальный уровень автоматизации, разумеется, предусмотрен даже в самой простой модели коллектора, например задание объема фракций и их числа до автоматической остановки коллектора и насоса или подача отметки на ленту регистратора после каждой смены пробирки (желательно с учетом сдвига по объему между моментом прохождения фракции через кювету детек­тора и ее поступлением в пробрхрку). Удобно, если коллектор снаб­жен цифровым индикатором номера фракции и объема, уже посту­пившего в пробирку. Во многих случаях, особенно при работе с радиоактивно меченными веществами, необходимо, чтобы в коллек­торе было предусмотрено устройство, управляющее клапаном, ко­торый запирает колонку во время смены пробирок. Нелишним явля­ется оснащение прибора «памятью» па случай временного отключения напряжения в сети, с тем чтобы он мог возобновить свою работу с прерванного положения после включения тока. Все электронные управляющие устройства желательно герметизировать для обеспе­чения  стабильной  работы  во  влажной  атмосфере.

 Менее необходимо (по в случае большой загрузки оправдано) использование коллекторов с микропроцессорами и программным управлением. Такие коллекторы, например, могут отбирать только материал, выходящий в составе пиков, и сливать элюепт между ними, собирать четкий одиночный пик в одну пробирку, а плохо разделившиеся пики — в несколько пробирок малого объема. Уп­равление этими операциями происходит в зависимости от амплитуды поглощения света, которую по заданной программе оценивает спе­циальное устройство, именуемое «Level-sensor» («Pharmacia», «LKB») или «Peakdetector» («Gilson»).

В препаративной и промышленной
хроматографии объемы целевых фракций могут измеряться десятками и сотнями литров и поэтому нецелесообразно использовать сложные механические приборы по перемещению больших массивов фракций или тракта с высоким расходом, поэтому в данном случае КФ представляет из себя прибор (часть хроматографа) в котором, поступающий с колонки элюат последовательно перенаправляется при помощи системы клапанов на различные выходы, соединенные с емкостями при помощи гибких шлангов. Циклическое переключение клапанов позоляет заменять заполненные емкости на пустые и собирать неограниченное число фракций. Периодичность переключения клапанов обычно задается при помощи компьютерной управляющей программы.

 

Рис.2 Препаративный хроматограф фирмы Sepragen. На передней панели расположены выходы 10 клапанов коллектора фракций.