Теория и практика хроматографии

Информация может оказаться полезной и не только начинающим.
http://www.meta-chrom.ru/support/skill-raising/
http://www.chromatec.ru/content/support/training.html
http://www.econova.ru/applications/education/education.php?set=school
Здесь представлены Российские производители хроматографического оборудования, далеко не все конечно.
Плохое оно или хорошее - решать вам. Мы не занимаемся рекламой, но хотим сказать, что в этих организациях работают настоящие профи и плохому не научат.

В мае в Центре Международной Торговли проводился 2-й Международный Конгресс-Партнеринг и Выставка по Биотехнологии, Биоэнергетике и Биоэкономике ЕвразияБИО. (Сайт: http://www.eurasiabio.ru/ ). Как говорят, конференция была достаточно интересной и познавательной, в том плане, что представляемые материалы в основной части не были простыми узкоспециализированными рекламными текстами, а несли и много систематизирующей информации, очень важной для понимания современных тенденций в биотехнологии.

Потребовалась новая колонка. Бабульку, которая набивала их 30 лет сократили. Дал набить девочкам- выходы пиков ровно в 2 раза быстрее получились. В общем при помощи Супины и всего ненормативного словарного запаса пришлось учиться самому.

Как мало хроматографисту надо для счастья:  воспроизводимости в ВЭЖХ достиг и счастлив до неприличия. Знакомая ситуация.

На данном видео показано как правильно соединять ВЭЖХ-колонку к трубке (капиляру) при помощи специальных коннекторов. Показано далеко не все, но некоторые моменты очень важны. Например хорошо видно, что перед упаковкой феррула достаточно свободно движется по трубке. Также легко понять какое усилие требуется для создания надежного соединения трубки и колонки.

Хроматографы фирмы Waters достаточно популярны в нашей стране. На видео показан запуск (включение) аналитического ВЭЖХ-хроматографа Water. Но я думаю данное видео будет интересно и другим хроматографистам, т.к. показана очень важная операция по заполнению шлангов и насосов хроматографа подвижными фазами при помощи шприца. Данную операцию надо проводить на всех ВЭЖХ-хроматографах после их простоя для удаления образовавшихся пузырьков газа.

     Хроматография довольно консервативная наука, т.к. практически со времен Михаила Семеновича Цвета для хроматографического разделения использовались плоско упакованные сорбенты (тонкослойная хроматография (

Одним из несомненных достоинств хроматографов General Electric является управляющая программа Unicorn. Данная программа разбита на несколько основных блоков, каждый из которых отвечает за свои функции. Тут и менеджер файлов (методов и хроматограмм) - Unicorn Manager; и редактор хроматограм - Evaluation; и System control - на каждый контролируемый хроматограф, а также редактор методов. Как понятно из названия в редакторе методов (Metod Editor) можно редактировать или создавать новые методы проведения хроматографических операций (промывка, регенерация, градиент и т.д.). Программы можно создавать как с помощью "Волшебника", так и в ручную, что обычно и делаю, т.к.

У Unicorn есть функция, позволяющая установить верхний предел давления и в дальнейшем, если давление на колонке привысит установленное значение, то будет снижаться поток, при котором давление будет постоянным. Функция просто замечательная, т.к. при нанесении, особенно первичного материала (культуральная жидкость, раствор гибридного белка и т.д.)

При самостоятельной упаковке сорбента следует избегать его передавливания. Так когда я работал на ВЭЖХ хроматографе, то однажды очередной упаковки обращено-фазного сорбента С18 в колонку я увидел, что давление повысилось. Я не обратил на это внимание, ацетоновый тест был нормальный и начал разделение. Но при элюции вместо привычной формы пика в виде гаусовской кривой (рисунок а) пик стал значительно ниже, шире и стал похож на холм с плоской вершиной (рисунок б).

Надо продолжить тему. Что из опыта желательно видеть перед глазами постоянно- это манометры давлений газов. Так что кроме редукторов ставим дополнительные манометры около хроматографа. Не забываем спроверять септу- мы по приывычке слюной:-) что не есть хорошо.  Если септа плохо закручена или просто резина плохая- свищ может появиться с первого закола. Соответственно если у вас изменились времена выходов пиков или изменилась высота пиков- проверяем первым делом септу.  Дальше- если нет автосемплера- работа со шприцем. Из опыта замечу- многие не чётко представляют как с ним работать.

Недавно ко мне обратились с вопросом "разумно ли приобретать Bio-Rad`овскую BioLogic LP System с целью препаратива белков, как у неё с надежностью, расходниками, подтеканием, соответствует ли производительность заявленной?"
Ни про объемы ни про метод ни слова: простора для полета фантазии хоть отбавляй. Например можно с ходу ответить: не подходит - по произволу подразумевая, что препаратив это от килограмма :). Смешно, но надо как-то поконкретней.

Вот получил нового красафца- Шимадзу LC 2010 Ант. А так как во время пуска занимался новыми Кристаллами- угадай Василий с трёх раз кого я буду распрашивать о работе с прибором:-)