Подбор условий

Лучшая серия статей о тестировании ионообменных сорбентов, используемых при хроматографической очистке белков

Про тестирование необходимость тестирования сорбентов и сложности, связанные с этим процессом я писал уже несколько раз. В настоящей же краткой записи я хочу обратить Ваше внимание на серию статей, написанной представителями компании Novo Nordisk и опубликованной в 2000-2007 г.г. в "Journal of Chromatography A".

Мое повышенное внимание именно к данным статьям обусловлено тем, что:

Зависимость эффективности гель-фильтрационной колонки от наличия предколонки и объема вкола

Недавно задали вопрос: как оценить эффективность хроматографической системы при гель-проникающей хроматографии и что делать если эффективность, определяемая так же как и в паспорте, не соответствует (значительно ниже) заявленной.

Оценка динамической емкости сорбентов, используемых при препаративной хроматографии белков

В предыдущем посте я много писал про подбор условий. Так вот, понятно, что подбирать можно все что угодно, но, считаю, что первоначально необходимо провести скрининг именно неподвижной фазы - сорбентов. Да и в практике достаточно часты частные случаи, когда по разным причинам (прекращение выпуска используемого сорбента, перебои с поставками, значительные различия характеристик от партии к партии, дороговизна и т.д.) приходится подбирать сорбент под существующую технологию.

Система BufferPrep для скрининга условий хроматографического разделения в Unicorn

Разработка любого хроматографического (аналитического или препаративного по цели) метода требует значительных временных и материальных затрат в связи с тем, что зачастую необходимо найти оптимальное соотношение множества значимых факторов: дешевизна, временные затраты, воспроизводимость, чувствительность, потери и т.д. и т.п. В результате необходимо провести большой объем экспериментальной работы как на этапе предварительного выбора оптимальных и/или отсева совсем неподходящих условий , так и на стадии отладки окончательной доводки методики.

Влияние температуры на разрешение пиков при ОФ ВЭЖХ хроматографии белковых смесей

Хорошо известно, что увеличение температуры значительно ускоряет массоперенос при хроматограмии. Особенно часто данный прием оптимизациии хроматографического разделения используют в распределительной хроматографии, где массоперенос аналита между хроматографическими фазами зачастую подобен (даже теории такие есть) массопереносу между двумя несмешивающимися (полярной и неполярной) жидкостями, а, следовательно, зависит от температуры наиболее сильно.

Влияние ТФУ на разделение белков при ОФ ВЭЖХ

При обращенно-фазовой ВЭЖ хроматографии белков в качестве модификатора очень часто используется трифторуксусная кислота в концентрациях от 0,05-0,2% по массе.

Тестирование аффинных сорбентов

Аффинная хроматография основана на строго специфическом взаимодействии связанных с сорбентом антител с антигеном. Благодаря этому аффинная хроматография достаточно широко применяется в биотехнологии, т.к. позволяет достаточно легко извлекать минимальные количества целевого вещества из больших объемов, зачастую очень сложных растворов. Но такая специфичность имеет и свою обратную сторону. Так если в катионообменной хроматографии в 90% случаев используют SP или CM Sepharose, то практически для любого белка можно получить несколько аффинных сорбентов с разной емкостью, специфичностью и т.д.

Для чего в практике хроматографии теория?

          Наш сайт называется «Теория и практика хроматографии», но, как я отметил, проработав в нескольких лабораториях/производствах, теория и практика хроматографии, зачастую, «общаются» как достаточно дальние родственники: изредка перезваниваются.

Нанесние материала на хроматографическую колонку под давлением

У Unicorn есть функция, позволяющая установить верхний предел давления и в дальнейшем, если давление на колонке привысит установленное значение, то будет снижаться поток, при котором давление будет постоянным. Функция просто замечательная, т.к. при нанесении, особенно первичного материала (культуральная жидкость, раствор гибридного белка и т.д.)

Проблемы с газовым хроматографом Varian: еще один ответ написьмо

Продолжаю отвечать на вопросы, хотя остаюсь при своем мнении, выраженном вчера, о необходимости использовать для вопросов форум на нашем сайте, где вести обсуждение заведомо удобнее.

Итак, от пользователя Nicolya поступило письмо следующего содержания:

"Здравствуйте, уважаемые.

Syndicate content