Недавно задали вопрос: как оценить эффективность хроматографической системы при гель-проникающей хроматографии и что делать если эффективность, определяемая так же как и в паспорте, не соответствует (значительно ниже) заявленной.

Всем здравствуйте! Давно не брал я в руки "шашки", а тут что то "занесло" и, знаете, на такой ерунде, что решил написать.

здравствуйте, надеюсь на Ваш опыт и советы. Вот такой вот новый зверь у меня появился UltiMate 3000 c  Масс-спектрометром SURVEYOR MSQ Plus . Но не могу понять, что с чувствительноситью. Какие параметры можно варьировать, что важнее всего. Хроматограф оснащён УФ детектором, так что я чётко вижу свои вещества на УФ детекторе....большие пики, а Масс показывает либо маленький бугорочек, либо вообще не фиксирует сигнал. Сейча я пробую делать эксперимент на хим ионизации APCI анализирую я антоцианы. Изучая литиратуру пришла к выводу, что больше народа делает на электроспрее.

Использование средств автоматизации в хроматографии, как и в любой другой прикладной области науки и техники, позволяет, зачастую, значительно улучшить как показатели самого, автоматизируемого процесса, так и общие производственные показатели лаборатории, цеха и т.д. Но cам процесс перехода на автоматизацию, даже, казалось бы, не значительную, требует как временных, так и материальных затрат, а иногда и привести к поломкам или выходу из строя.

В аналитической хроматографии довольно широко распростраены методы, в которых используются хроматографические колонки с "мягкими" сорбентами. Это, в основном, сорбенты на основе сверхсшитых природных углеводных полимеров декстрана, агарозы и т.д., выпускаемые под марками Sepharose, Superdex, Sephadex и т.д.

Про Chromeleon я писал уже не раз (тут и тут, например). Вообщем, пока для меня это эталон управляющей программы и лучше мне не нужно, т.к. пока ни разу не вcтречался ни с одной проблемой, которую нельзя бы было решить средствами данной программы, но возможно тут дело и в отсутствии опыта.

Вообщем, завлеченный красивыми презентационными видео-роликами я, при установку Dionex Ultimate 3000 попросил установить Chromeleon 7.1, а не 6.8 (можно было выбирать). Кратко резюмирую: зря.

У хроматографической колонки существует несколько параметров, которые желательно как контролировать при покупке, так и при подозрении на ее повреждение во время работы. Некоторые из них , такие как: "мертвый объем", качество и эффективность набивки хроматографической колонки - легко можно оценить по форме пика неудерживаемого в используемой хроматографической системе вещества, пропущенного через колонку.

Таким образом используемое вещество должно обладать несколькими важными свойствами:

1. Быть хорошо растворимым в подвижной фазе

2. Уверенно регистрироваться детектором

Однажды был какой-то на удивление дурацкий день: у меня 2 раза в моем присутствии при фильтрации забивался фильтр и мигом его срывало к чертовой матери, в результате чего ренатурат капал даже с потолка, еще у одного здорового парня вдруг кровь пошла носом ну и так по мелочи. А еще у одного хроматографиста метод, который он перенес уже на десяток с лишним хроматографов, по непонятным причинам ни как не хотел воспроизводиться на очередном ВЭЖХ-хроматографе.

Хроматограф очень капризная штука: подавай ему все самое лучшее. А еще ему нужно электричество, тоже очень хоршего качества и, желательно, без перебоев. Об этом как-то многие или забывают или не придают особого значения. Но до тех пор пока горячий петух не клюнет, ну или особо деятельный электрик ни кого не предупредив в щиток полезет:). Так что об бесперебойном питании хроматографа желательно беспокоиться заранее.

Повышение давления в ВЭЖХ системе достаточно часто встречающаяся проблема. Причины могут быть разные и все их можно разделить на две основные группы:

1. засорение жидкостного тракта хроматографа 

2. загрязнение хроматографической колонки.