Разработка любого хроматографического (аналитического или препаративного по цели) метода требует значительных временных и материальных затрат в связи с тем, что зачастую необходимо найти оптимальное соотношение множества значимых факторов: дешевизна, временные затраты, воспроизводимость, чувствительность, потери и т.д. и т.п. В результате необходимо провести большой объем экспериментальной работы как на этапе предварительного выбора оптимальных и/или отсева совсем неподходящих условий , так и на стадии отладки окончательной доводки методики.
В настоящее время при разработке технологий и пилотном производстве фармпрепаратов на основе белков активно используется технология FPLC, основанная на использовании сорбентов, матрица, которых состоит из сверхсшитых полимеров природного или искусственного происхождения. Данные сорбенты за счет своей относительно жесткой и ажурной структуры создают очень низкое сопротивление даже вязким белковым растворам при высоких (зачастую более 300 см/час) и обладают очень высокой емкостью (от 20 до 100 и более мг белка/мл сорбента).
Хроматограф очень капризная штука: подавай ему все самое лучшее. А еще ему нужно электричество, тоже очень хоршего качества и, желательно, без перебоев. Об этом как-то многие или забывают или не придают особого значения. Но до тех пор пока горячий петух не клюнет, ну или особо деятельный электрик ни кого не предупредив в щиток полезет:). Так что об бесперебойном питании хроматографа желательно беспокоиться заранее.
Unicorn, конечно очень хорошая программа, но в ней есть и существенные, на мой взгляд, недостатки, затрудняющие интерпритацию хроматографических данных и ведение хроматографии как таковой.
Одним из несомненных достоинств хроматографов General Electric является управляющая программа Unicorn. Данная программа разбита на несколько основных блоков, каждый из которых отвечает за свои функции. Тут и менеджер файлов (методов и хроматограмм) - Unicorn Manager; и редактор хроматограм - Evaluation; и System control - на каждый контролируемый хроматограф, а также редактор методов. Как понятно из названия в редакторе методов (Metod Editor) можно редактировать или создавать новые методы проведения хроматографических операций (промывка, регенерация, градиент и т.д.). Программы можно создавать как с помощью "Волшебника", так и в ручную, что обычно и делаю, т.к.
У Unicorn есть функция, позволяющая установить верхний предел давления и в дальнейшем, если давление на колонке привысит установленное значение, то будет снижаться поток, при котором давление будет постоянным. Функция просто замечательная, т.к. при нанесении, особенно первичного материала (культуральная жидкость, раствор гибридного белка и т.д.)
За последние пол года сумел побывать на 3 совершенно разных биотехнологических фирмах и на всех 3 основными хроматографами были вот эти красавцы:
Очень качественное видео по упаковке аксиальных колонок низкого давления, показаны все основные этапы: подготовка колонки, заполнение сорбентом, упаковка, распаковка. На таком Тарас Алексеевич Горкун (тут, TAG) работает, завидуйте!