Подбор условий (37)

Лучшая серия статей о тестировании ионообменных сорбентов, используемых при хроматографической очистке белков

Про тестирование необходимость тестирования сорбентов и сложности, связанные с этим процессом я писал уже несколько раз. В настоящей же краткой записи я хочу обратить Ваше внимание на серию статей, написанной представителями компании Novo Nordisk и опубликованной в 2000-2007 г.г. в "Journal of Chromatography A".

Мое повышенное внимание именно к данным статьям обусловлено тем, что:

Зависимость эффективности гель-фильтрационной колонки от наличия предколонки и объема вкола

Недавно задали вопрос: как оценить эффективность хроматографической системы при гель-проникающей хроматографии и что делать если эффективность, определяемая так же как и в паспорте, не соответствует (значительно ниже) заявленной.

Воспроизведение новой метоики или еще раз про уравновешивание

Всем здравствуйте! Давно не брал я в руки "шашки", а тут что то "занесло" и, знаете, на такой ерунде, что решил написать.

Оценка динамической емкости сорбентов, используемых при препаративной хроматографии белков

В предыдущем посте я много писал про подбор условий. Так вот, понятно, что подбирать можно все что угодно, но, считаю, что первоначально необходимо провести скрининг именно неподвижной фазы - сорбентов. Да и в практике достаточно часты частные случаи, когда по разным причинам (прекращение выпуска используемого сорбента, перебои с поставками, значительные различия характеристик от партии к партии, дороговизна и т.д.) приходится подбирать сорбент под существующую технологию.

Система BufferPrep для скрининга условий хроматографического разделения в Unicorn

Разработка любого хроматографического (аналитического или препаративного по цели) метода требует значительных временных и материальных затрат в связи с тем, что зачастую необходимо найти оптимальное соотношение множества значимых факторов: дешевизна, временные затраты, воспроизводимость, чувствительность, потери и т.д. и т.п. В результате необходимо провести большой объем экспериментальной работы как на этапе предварительного выбора оптимальных и/или отсева совсем неподходящих условий , так и на стадии отладки окончательной доводки методики.

Особенности использования 2-х позиционного 6-ти портового клапана для автоматической смены колонок на примере Ultimate 3000

Использование средств автоматизации в хроматографии, как и в любой другой прикладной области науки и техники, позволяет, зачастую, значительно улучшить как показатели самого, автоматизируемого процесса, так и общие производственные показатели лаборатории, цеха и т.д. Но cам процесс перехода на автоматизацию, даже, казалось бы, не значительную, требует как временных, так и материальных затрат, а иногда и привести к поломкам или выходу из строя.

Особенности проведения ВЭЖХ анализа на колонках с "мягкими" сорбентами

В аналитической хроматографии довольно широко распростраены методы, в которых используются хроматографические колонки с "мягкими" сорбентами. Это, в основном, сорбенты на основе сверхсшитых природных углеводных полимеров декстрана, агарозы и т.д., выпускаемые под марками Sepharose, Superdex, Sephadex и т.д.

Определение качества упаковки гель-фильтрационных колонок с сорбентами на основе силикагеля и сверхсшитой агарозы

Аналитическая гель-эксклюзивная хроматография (size exclusion chromatography) очень широко распространенный метод для качественного и колличественного анализа состава сложных смесей различного происхождения. Как известно гель-фильтрация основана на распределении молекул аналита по их размерам и принципиально отличается от всех остальных видов хроматографий тем, что аналит не сорбируется (не должен) на сорбенте, т.к. распределение молекул происходит во время их движения сквозь слой пористого сорбента.

Определение мертвого объема колонки. Рассмотрение возможности применения ацетонового теста для обращенно-фазных колонок.

У хроматографической колонки существует несколько параметров, которые желательно как контролировать при покупке, так и при подозрении на ее повреждение во время работы. Некоторые из них , такие как: "мертвый объем", качество и эффективность набивки хроматографической колонки - легко можно оценить по форме пика неудерживаемого в используемой хроматографической системе вещества, пропущенного через колонку.

Таким образом используемое вещество должно обладать несколькими важными свойствами:

1. Быть хорошо растворимым в подвижной фазе

2. Уверенно регистрироваться детектором

К чему ведет выбор сорбента с неподходящей пористостью при обращенно-фазовой хроматографии белков

Обращенно-фазовая хроматография, наверное, самый распространенный метод колличественного и качественного определения белков в сложных системах, а также самый оптимальный, по соотношению выход/степень очистки, метод препаративного и промышленного получения высокоочищенных (более 90%) белков. Но для достижения эффективности и воспроизводимости получаемых данных необходимо провести ряд обязательных дополнительных исследований. Одним из которых является правильный подбор неподвижной фазы.

RSS-материал