Для чего в практике хроматографии теория?

          Наш сайт называется «Теория и практика хроматографии», но, как я отметил, проработав в нескольких лабораториях/производствах, теория и практика хроматографии, зачастую, «общаются» как достаточно дальние родственники: изредка перезваниваются. И поэтому, в основном, в лабораториях все хроматографические методы/процессы разрабатываются эмпирически при этом практикующие хроматографисты зачастую руководствуются элементарной логикой, а не хроматографической теорией, беря оттуда только самые простейшие решения, например:

          ага, чтобы выбрать между катионо- и анионообменником при данном рН надо знать pI белка;

          белок «большой»/«маленький», следовательно, надо поры сорбента (концентрацию геля) тоже взять «больше»/«меньше»;

          С18 более гидрофобен, чем С4и т.д.

          Вот такая тривиальщина, даже не уверен, что эти данные могут называться громким словом «Теория».

          Сам я не лучше, например, до совсем недавнего времени ацетоновый тест использовал только как качественный показатель и ни каких там «тарелок» и ассиметрии по нему и не думал считать: вышел пик ровный как Гауссово распределение в нужное время, ну и погнал счастливо разделение. И ведь все получалось!

          Но и после того как начал рассчитывать (точнее Unicorn) каких-то дополнительных бонусов это не принесло кроме того, что в журнале колонки появились количественные характеристики ее забивки. Но это уже вопросы стандартизации процесса, а не хроматографии как таковой: делилось бы при другом количестве тарелок - писали бы другую цифру вот и все.

          Вот меня и заел вопрос: «Может я просто не в тех местах работаю? А вот где-то в чудо-местах сидят хроматографисты, к которым приходят исходные данные аналита и они тут же на бумажке (ну на компьютере), просчитав все его важные характеристики (ну там эффективный радиус молекул, дипольный момент, полярность и т.д.),  выдают: берете такую-то колонку, те-то фазы и при таких-то потоке и градиенте искомый агент выйдет одиноким пиком на такой-то минуте!».

          Это конечно, ерничанье, но очень хочется хоть какой-то определенности вместо: «Нууу, давайте попробуем, что ли, на этом поделить, раз кто-то слышал, что где-то что-то подобное как-то так делили. - Ага, ни хрена не разделилось, но хоть сел ! и даже что-то сошло!!, но опять все вместе. – Ну, давай теперь буфер поменяем (хаотропа/детергента добавим или рН понизим/повысим или сорбент другой фирмы возьмем) и посмотрим что будет. и т.д.»

          Так что вопрос такой: Какие теоретические выкладки помогают Вам при планировании и проведении хроматографического разделения?

          Очень надеюсь на ответы.

          Всем удачи.

Алексей's picture

...практика без теории слепа, теория без практики глупа...

Разрабатывать методику самому - дороже будет. Лучше всего ее заказать производителю хроматографов. При необходимости отправить необходимые смеси.  Почему: во-первых, на разработку самой методики уйдет дай бог месяца два, во-вторых, эту методику надо аттестовать, в третьих, недо приобрести необходимые для изготовления сорбента компоненты. И, в лучшем случае у вас появится насадочная приличная колонка. А теперь посчитайте затраты на з/п не только инженеров и лаборантов, но и содержание начальства ЦЗЛ, свет, электричесво, газы, стоимость забракованного в процессе разработки методики сорбента, стоимость получившегося сорбента. Игра не стоит свеч. Сейчас капилярная колонка стоит около 1000руб/метр. Ну будет там метров 40. Все равно будет дешевле. Эта колонка может прожить несколько лет (конечно в зависимости от условий работы и анализируемых компонентов). У нас ЦЗЛ почти перевели на такую работу. Еще пока создают методики на оставшихся запасах сырья и материалов. Но запас уже не пополняется. Лично для меня, для установки, калибровки, эксплуатации и ремонта теория нужна для того чтобы знать принципы работы хроматографа, когда градуировочный график может иметь нелинейную форму, какие причины могут вызвать плохую работу хроматографа, какой вообще хроматограф ставить в конкретной ситуации и т.п. (перечень можно дополнять и дополнять, но не с точки зрения изготовления методик и сорбента). Ведь не будешь же ставить ГХ с ДТП на измерение мономеров в воздухе на уровне ПДК.

Гость's picture

В нашей

В нашей лаборатории разработали и используют метод предсказывания времени удерживания пептидов в зависимости от их аминокислотного состава. Сильно пригождается для правильной идентификации белков, а также для разработки MRM-методик для масс-спектрометрии.

О пользователе

Василий's picture
User offline. Last seen 25 weeks 1 day ago. Offline
Администраторы



Настоящее имя Купцов Василий

Пол мужской

Дата рождения 28/01/1979

Мой сайт http://www.chromatogramma.ru/

Joined: 20/05/2009