Ацетоновый тест на ВЭЖХ хроматографе Varian

Начав работать на Varian'е я столкнулся с тем, что у меня плавали площади пиков на ProStar PL-ELSD 2100, лазерном детекторе, и я ни как не мог понять в чем дело, то ли методическая ошибка, то ли еще что (у него еще отклик не линейный). И тогда я решил проверить точность вкола. Самым простым способом является ацетоновый тест, но лазерный детектор ацетон не "видит", к тому же было подозрение, что на диольной колонке он будет задерживаться. Мне помогло то, что у меня после колонки стоит УФ-детектор, который, как известно отличается линейностью отклика, а также прекрасно детектирующий ацетон на 280нм. Проведя несколько пробных вколов фазы с различным содержанием ацетона я определил, что: во-первых, в моей фазе (50% н-гексана и 50% изопропанола) ацетон на колонке не задерживается, а, во-вторых,  оптимальной является 5% концентрация ацетона, при которой отклик детектора во всем интересующем меня диапазоне объемов вкола (2-30 мкл) был примерно линейным. Затем проведя серии последовательных вколов этого р-ра ацетона я получил несколько интересных результатов:

1. Площади пиков действительно плавают, причем точность "вкола" значительно падает с уменьшением объма, так с уменьшением вкола с 20 до 10 мкл дисперсия увеличилась в 3 раза.

2. Часть материала с предыдущего вкола видимо остается в петле или игле, тем самым влияя на следующий вкол. Что приводит к тому, что первый анализ - вылетает, и только во 2 и 3 "вколах" наблюдается воспроизводимость.

Результаты ацетоновых тестов приведены в прикрепленном файле.

AttachmentSize
ацетоновый тест на Varian.xls47 KB

О пользователе

Василий's picture
User offline. Last seen 1 year 8 weeks ago. Offline
Администраторы



Настоящее имя Купцов Василий

Пол мужской

Дата рождения 28/01/1979

Мой сайт http://www.chromatogramma.ru/

Joined: 20/05/2009